一、背景介紹
輔助噬菌體是一種自身 DNA 復(fù)制效率極低的絲狀噬菌體突變型。其基因組具有M13噬菌體的所有功能基因，但I(xiàn)G區(qū)是缺陷的，不能被pⅡ蛋白識(shí)別，因而輔助噬菌體本身DNA不能進(jìn)行單鏈復(fù)制。輔助噬菌體能為噬菌粒提供pⅡ蛋白和包裝蛋白，在輔助噬菌體的幫助下，噬菌粒可以順利的進(jìn)行DNA的復(fù)制與噬菌體的包裝，完成對(duì)宿主的侵染（這一過(guò)程常稱(chēng)為超染）。常用的輔助噬菌體有VCSM13和M13K07 。
二、工作原理
當(dāng)含有重組基因的噬菌粒轉(zhuǎn)染至大腸桿菌后，再用輔助噬菌體進(jìn)行超染，輔助噬菌體合成的 pⅡ蛋白就會(huì)優(yōu)先識(shí)別噬菌粒上的正常基因間隔區(qū)（IG region）,啟動(dòng)滾環(huán)復(fù)制，產(chǎn)生ssDNA，這樣所產(chǎn)生的子代噬菌體外殼蛋白所包裝的 ssDNA 主要是來(lái)自含有重組基因組的噬菌粒的 DNA，并同時(shí)展示噬菌粒編碼的 pⅢ或 pⅧ與外源肽段的融合蛋白和輔助噬菌體編碼的野生型 pⅢ或 pⅧ蛋白，確保重組噬菌體能正常感染組裝和增值。
三、產(chǎn)品信息
M13KO7 輔助噬菌體是 gII基因具有Met40IIe突變的M13噬菌體，具有來(lái)自于 P15A 的復(fù)制起點(diǎn)以及來(lái)自于 Tn903 的卡那霉素抗性基因，這兩個(gè)片段插入M13的復(fù)制起點(diǎn)。M13KO7 能夠在缺少噬菌粒 DNA 的情況下進(jìn)行復(fù)制，當(dāng)存在一個(gè)攜帶有野生型 M13 或 f1 復(fù)制起點(diǎn)的噬菌粒時(shí)，單鏈?zhǔn)删?huì)被優(yōu)先包裝并被分泌到培養(yǎng)基中，因此其常用于噬菌體展示抗體庫(kù)構(gòu)建。
五、產(chǎn)品說(shuō)明
